構(gòu)建酵母多基因表達(dá)系統(tǒng)時(shí)，你是否面臨這些挑戰(zhàn)：?jiǎn)?dòng)子/終止子活性不穩(wěn)定，重復(fù)實(shí)驗(yàn)耗時(shí)耗材？多片段組裝效率低，Gibson克隆成本居高不下？實(shí)驗(yàn)室間元件不兼容，合作研究難以標(biāo)準(zhǔn)化？

酵母基因組裝不用“東拼西湊”，一起來看看這個(gè)“基因組裝神器”—MoClo-YTK模塊化酵母克隆工具包!

MoClo-YTK如何成為實(shí)驗(yàn)室“基因組裝神器”？

MoClo-YTK（Modular Cloning Yeast ToolKit）是一種專為酵母設(shè)計(jì)的模塊化克隆工具包，用于高效、靈活地組裝多基因遺傳回路或代謝通路。它結(jié)合了Golden Gate Assembly的高效拼接方法和標(biāo)準(zhǔn)化模塊的設(shè)計(jì)理念，極大地簡(jiǎn)化了復(fù)雜多基因構(gòu)建的流程。

該工具包含有一組96 個(gè)已驗(yàn)證的高活性啟動(dòng)子、終止子、篩選標(biāo)記等標(biāo)準(zhǔn)化元件，確?；虮磉_(dá)穩(wěn)定性和可重復(fù)性。其可用于自下而上分層組裝單基因和多基因構(gòu)建體，供釀酒酵母表達(dá)；其設(shè)計(jì)也兼容基于重組的克隆，如酵母體內(nèi)組裝、獨(dú)立連接克?。⊿LIC）或Gibson組裝。按標(biāo)準(zhǔn)流程，可在三天內(nèi)從 PCR 模板構(gòu)建多基因質(zhì)粒。MoClo-YTK廣泛適用于合成生物學(xué)研究、酵母基因組工程、代謝通路優(yōu)化、多基因表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建等領(lǐng)域。

MoClo-YTK 核心特點(diǎn)？

模塊化構(gòu)建：所有元件遵循BglBrick標(biāo)準(zhǔn)，兼容國際合成生物學(xué)通用格式（如MoClo、GoldenBraid），支持跨實(shí)驗(yàn)室元件共享。開放架構(gòu)設(shè)計(jì)，用戶可靈活添加自定義元件或接入第三方工具（如Tom Ellis實(shí)驗(yàn)室的MYT升級(jí)工具包）。

Golden Gate Assembly 技術(shù)：基于Golden Gate技術(shù)，單次反應(yīng)可完成多片段（5-10個(gè)）組裝，成功率>90%，實(shí)驗(yàn)周期縮短50%以上。

酵母優(yōu)化：模塊針對(duì)酵母表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)化，包含酵母特異的啟動(dòng)子（如 TEF1、GAL1）、終止子、篩選標(biāo)記（如 URA3、HIS3）等。支持單拷貝或多拷貝整合到酵母基因組，或作為游離型質(zhì)粒維持。

全流程驗(yàn)證：每個(gè)DNA元件均經(jīng)過啟動(dòng)子強(qiáng)度、終止子效率、篩選標(biāo)記穩(wěn)定性等實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

可擴(kuò)展性強(qiáng)：用戶可根據(jù)需求自定義和擴(kuò)展模塊，增加新的調(diào)控元件、代謝途徑等。與植物（MoClo-Plant）、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等其他MoClo系統(tǒng)兼容，便于跨物種研究。

低成本兼容性：適配常規(guī)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，普通PCR儀、電泳裝置即可完成實(shí)驗(yàn)，無需特殊儀器，試劑耗材成本較傳統(tǒng)Gibson組裝法降低70%。

基于 MoClo 的標(biāo)準(zhǔn)化分層裝配策略

（圖片來源https://pubs.acs.org/doi/10.1021/sb500366v）

MoClo-YTK如何賦能研究？

MoClo-YTK作為先進(jìn)的酵母模塊化克隆工具包，通過"標(biāo)準(zhǔn)化元件庫+高效Golden Gate組裝"的技術(shù)組合，正在革命性地推動(dòng)前沿研究領(lǐng)域的發(fā)展。

合成生物學(xué)：構(gòu)建復(fù)雜基因回路

在合成生物學(xué)領(lǐng)域，該工具包使復(fù)雜基因回路的構(gòu)建周期縮短70%：以重金屬生物傳感器為例，研究人員僅用3天就完成了包含響應(yīng)元件、阻遏蛋白和報(bào)告基因的AND邏輯門組裝，而傳統(tǒng)方法需要2周以上，相關(guān)成果已發(fā)表于《ACS Synthetic Biology》（2018）。

代謝工程：高效優(yōu)化產(chǎn)物合成途徑

代謝工程應(yīng)用則展現(xiàn)出更驚人的提升，通過預(yù)驗(yàn)證的啟動(dòng)子庫精準(zhǔn)調(diào)控代謝流，β-胡蘿卜素生產(chǎn)菌株的產(chǎn)量提升3-5倍，達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)要求的1.2g/L（《Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology》，2020）。

MoClo-YTK是高效的模塊化酵母克隆工具包，基于Golden Gate技術(shù)實(shí)現(xiàn)高成功率多基因組裝。包含96個(gè)標(biāo)準(zhǔn)化元件，適用于代謝通路優(yōu)化、酵母工程與合成生物學(xué)研究，兼容多種克隆方法，支持快速構(gòu)建與低成本應(yīng)用。這些突破性進(jìn)展與MoClo-YTK兩大核心技術(shù)優(yōu)勢(shì)密不可分：其一，96個(gè)已驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)化元件（涵蓋10種強(qiáng)度啟動(dòng)子、8種低泄露終止子）確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性；其二，Golden Gate組裝技術(shù)實(shí)現(xiàn)5-10個(gè)片段的一步拼接，成功率>90%。該工具包已獲得全球近600篇學(xué)術(shù)文獻(xiàn)引用，并被多家生物技術(shù)企業(yè)用于加速合成生物學(xué)、生藥物開發(fā)進(jìn)程，充分驗(yàn)證了其在基礎(chǔ)研究和產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化中的雙重價(jià)值。

MoClo-YTK 模塊化酵母克隆工具包詳情

注：生物資源類業(yè)務(wù)屬于公益共享，我們銷售的不是菌種所有權(quán)，菌種屬于專利所有者，使用者僅可用于做科學(xué)研究，不可做其他用途。產(chǎn)品標(biāo)價(jià)均為培養(yǎng)服務(wù)費(fèi)

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Reference：

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