答：一般菌體的形態(tài)有：平板培養(yǎng)菌、穿刺培養(yǎng)菌，甘油保存菌或新鮮菌液等。我們提倡寄送穿刺培養(yǎng)菌或新鮮菌液。平板培養(yǎng)菌運(yùn)送特別不方便，我們收到的一些平板培養(yǎng)菌的培養(yǎng)皿在運(yùn)送過(guò)程中常常已經(jīng)破碎，面目全非，需要用戶重新寄樣。這樣既誤時(shí)間，又浪費(fèi)客戶的樣品。一旦是客戶非常重要的樣品時(shí)，其后果更不可設(shè)想。而甘油保存菌則容易污染。制作穿刺菌時(shí)，可在1。5ml的Tube管中加入瓊脂培養(yǎng)基，把菌體用牙簽穿刺于瓊脂培養(yǎng)基(固體)中，37℃培養(yǎng)一個(gè)晚上后便可使用。穿刺培養(yǎng)菌在4℃下可保存數(shù)個(gè)月，并且不容易污染，便于運(yùn)送。

如果您需要對(duì)過(guò)表達(dá)或者表達(dá)降低目的基因的細(xì)胞進(jìn)行反復(fù)試驗(yàn)，那么構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株是有必要的。
第一，可以減少不同批次實(shí)驗(yàn)中轉(zhuǎn)染效率差異帶來(lái)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果差異，提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。
第二，構(gòu)建好細(xì)胞系后不必再進(jìn)行瞬時(shí)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)以及反復(fù)制備質(zhì)粒，減少工作量。
第三，不再使用價(jià)格高昂的轉(zhuǎn)染試劑，節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。

不是所有的細(xì)胞株都能構(gòu)建成為穩(wěn)定細(xì)胞系的。構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系需要滿足2個(gè)條件：

1、細(xì)胞能穩(wěn)定傳代；

2、細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率滿足要求。

1.一致性和重復(fù)性高:抗體生產(chǎn)質(zhì)量可控,抗體的批次間差異小。

2.可以避免雜交瘤細(xì)胞制備中如基因丟失、基因突變和細(xì)胞株漂移等問(wèn)題。

3.靈敏度和特異性強(qiáng):利用重組技術(shù),更容易通過(guò)抗體工程提高抗體特異性和靈敏度。

4.高通量、高效率:簡(jiǎn)化客戶的抗體發(fā)現(xiàn)流程,以指定形式表達(dá)的優(yōu)質(zhì)抗體滿足您特定的實(shí)驗(yàn)需求。

5.無(wú)動(dòng)物體外生產(chǎn)。

多克隆抗體特點(diǎn)：

1.識(shí)別任一抗原上的多個(gè)表位，所得血清為異質(zhì)性抗體混合物，親和力各有不同

2.主要有IgG亞類組成
3.通常使用多肽免疫原制備以獨(dú)有表位為靶標(biāo)的多克隆抗體，尤其是針對(duì)高同源性蛋白家族

優(yōu)劣勢(shì)：

1. 高親和性：由于靶蛋白上的多個(gè)表位能夠結(jié)合不止一個(gè)抗體分子，多抗可放大低表達(dá)水平靶蛋白的信號(hào)
2.可識(shí)別多個(gè)表位，有利于免疫沉淀和染色質(zhì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)獲得更好的結(jié)果
3.與相似抗原有更多交叉反應(yīng)，可放大低表達(dá)信號(hào)，染色背景干擾較高
4.對(duì)微小抗原變化的包容性更強(qiáng)，可檢測(cè)同源性的蛋白家族

單克隆抗體特點(diǎn)：

1. 識(shí)別一個(gè)抗原上的單一抗原表位
2.僅由一種抗體亞型組成（IgG1、IgG2、IgG3）如需使用二抗進(jìn)行檢測(cè)，應(yīng)針對(duì)正確的亞類選擇抗體

優(yōu)劣勢(shì)：

1.高特異性：?jiǎn)慰惯m用于實(shí)驗(yàn)中的一抗，產(chǎn)生背景染色信號(hào)通常顯著低于多克隆抗體
2.與多抗相比，同質(zhì)性較高，結(jié)果重現(xiàn)性較高
3.特異性地檢測(cè)一個(gè)靶表位，不易與其它蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，染色背景干擾低
4.檢測(cè)單一抗原或蛋白質(zhì)家族的單一成員

用于生產(chǎn)抗體的宿主具有許多種,最常見(jiàn)的兩種是小鼠和兔子。小鼠通常是用于產(chǎn)生單克隆抗體的宿主,具有免疫周期較短、成本較低等優(yōu)勢(shì)。小鼠抗體可用于早期發(fā)現(xiàn)研究，體內(nèi)臨床前治療研究,體外診斷。與小鼠相比,兔子具有較高的成功率和更廣泛的抗原適應(yīng)范圍。兔子抗體可以識(shí)別更多種類的表位,與小鼠抗體相比具有更高的親和力和特異性。

減少免疫原性、保持親和力和特異性、提高臨床應(yīng)用的安全性和有效性

抗體設(shè)計(jì)涉及到多個(gè)方面，包括免疫原的設(shè)計(jì)、免疫過(guò)程的優(yōu)化、目的抗體篩選、抗體純化、應(yīng)用鑒定等。免疫原可以是天然蛋白、重組蛋白、多肽或DNA。設(shè)計(jì)免疫原時(shí)，需考慮免疫原分子的特點(diǎn)和抗體的應(yīng)用，以確定使用哪種類型的免疫原和免疫原的序列。

抗體發(fā)現(xiàn)的方法包括噬菌體展示技術(shù)、雜交瘤技術(shù)等。其中，噬菌體展示技術(shù)是一種將外源蛋白或多肽的編碼基因插入到噬菌體外殼蛋白結(jié)構(gòu)基因的適當(dāng)位置，使外源基因隨外殼蛋白的表達(dá)而表達(dá)，同時(shí)，將外源蛋白或多肽展示在噬菌體表面，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)蛋白或多肽與相應(yīng)受體結(jié)合的技術(shù)。

原理不同：

5’RACE是在低豐度轉(zhuǎn)錄本中快速擴(kuò)增cDNA的5’端

多重PCR與普通PCR相同

擴(kuò)增區(qū)域：

5’RACE可擴(kuò)增區(qū)域?yàn)镃DR1-3

多重PCR可擴(kuò)增區(qū)域?yàn)镃DR3

疫苗的設(shè)計(jì)與評(píng)估、腫瘤診斷、自身免疫性疾病等

雜交瘤細(xì)胞測(cè)序相較于直接對(duì)抗體進(jìn)行基于蛋白質(zhì)分析的測(cè)序相比,提供更準(zhǔn)確更可靠的結(jié)果,防止蛋白測(cè)序中如亮氨酸/異亮氨酸較難區(qū)分等潛在風(fēng)險(xiǎn)。